概述
全蛋白组层面的药物靶点发现。TPP（热蛋白质组学/CETSA-MS）利用"配体结合改变蛋白热稳定性"原理：细胞裂解液与药物 25 °C 孵育 30 分钟后，在 37–62 °C 之间以 2.5 °C 梯度加热，离心分离各温度点可溶性蛋白，经酶解脱盐后进入定量蛋白质组检测；比较各蛋白熔解曲线位移即可无偏倚地发现药物直接靶点与脱靶蛋白。
技术优势
- ✓ 裂解液水平直接捕获靶点，无需固定化配体
- ✓ 一次实验并行评估数千蛋白的热稳定性
- ✓ 可区分直接靶点与间接效应
- ✓ 2D-TPP 可同时获得剂量-效应关系
实验流程
具体流程将根据样品类型与项目目标定制，最终以技术方案为准。
应用方向
活性化合物（天然产物、老药新用）靶点鉴定
药物脱靶效应与毒性机制预测
PROTAC/分子胶降解谱评估
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | PBS 清洗后离心去除上清，液氮速冻，干冰运输 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 新鲜组织液氮速冻，-80 °C 保存，干冰运输 |
| 体液样品 | 血清/血浆 ≥ 100 µL | 低速离心取上清，-80 °C 保存，干冰运输 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 建议设置阴/阳性对照或内参样品 |