单ADP核糖基化（MARylation）泛抗体富集试剂盒（MAR） | 试剂产品

单ADP核糖基化（MARylation）泛抗体富集试剂盒

Pan Anti-Mono-ADP-Ribose Enrichment Kit（MAR Kit）

高亲和力修饰泛抗体，位点级特异性富集

富集倍数 ≥ 100×，显著提高ADP-核糖基化修饰鉴定精度

适用于修饰组学质谱前富集与 WB/IP 修饰验证

随盒 SOP 与质检报告，技术团队全程支持

货号：MH-MAR-10（10 rxn）/ MH-MAR-50（50 rxn）

产品描述

蛋白质单 ADP 核糖基化（MARylation）由 PARP / Mono-ART 家族酶催化，将单个 ADP 核糖单元转移至靶蛋白的 Glu / Asp / Lys / Arg / Ser 等残基侧链，修饰丰度低、半衰期短，信号易被高丰度非修饰肽段掩盖。本试剂盒以经修饰肽段亲和纯化的高亲和力单ADP核糖基化（MARylation）泛抗体（anti-MAR）为核心，偶联于顺磁珠/琼脂糖凝胶，可从复杂酶解肽段中特异性捕获ADP-核糖基化修饰肽段，配合高分辨质谱即可完成全蛋白水平ADP-核糖基化修饰位点的大规模鉴定与定量；亦可用于免疫印迹、免疫沉淀验证整体ADP-核糖基化修饰水平变化。ADP-核糖基化由PARP/Mono-ART家族酶催化，将NAD⁺来源的ADP核糖单元（单或多聚）转移至靶蛋白，是DNA损伤修复与"旁敲效应"（parthanatos）的核心事件，PARP抑制剂的成功使其成为精准医学研究热点。

产品组分

组分	规格（10 rxn / 50 rxn）	保存条件
修饰泛抗体偶联磁珠/琼脂糖凝胶	500 µL / 2.5 mL	20% 乙醇，2–8 °C，勿冻融
结合缓冲液（5×）	10 mL / 50 mL	2–8 °C
洗涤缓冲液 I / II / III（10×）	各 10 mL / 各 50 mL	2–8 °C
洗脱缓冲液（0.1% TFA）	5 mL / 25 mL	2–8 °C
产品说明书与质检报告（COA）	1 份	—

技术参数

产品名称	单ADP核糖基化（MARylation）泛抗体富集试剂盒（MAR Kit）
货号	MH-MAR-10 / MH-MAR-50
规格	10 次富集 / 50 次富集（以每次 1 mg 酶解肽段计）
抗体来源	兔源多克隆/单克隆抗体（经修饰肽段亲和纯化）
识别表位	单 ADP 核糖基化修饰残基（MAR，可发生于 Glu / Asp / Lys / Arg / Ser 等侧链）
适用样本	哺乳动物细胞、组织、体液蛋白等酶解肽段
交叉反应	与未修饰肽段及多聚 ADP 核糖基化（PAR）交叉反应 < 5%（宏结构域对照验证）
富集倍数	≥ 100×（修饰肽段/非修饰肽段比例提升）
保存条件	抗体偶联凝胶 2–8 °C 保存；衍生化试剂 -20 °C 避光保存
产物与运输	富集产物形式：胶条（浓缩胶处切下，置于 EP 管中，纯水没过）/ 磁珠 / 洗脱液；胶条、磁珠冰袋运输，洗脱液干冰运输

使用方法

样品准备

收集细胞（≥ 5×10⁶ 个）或组织（≥ 50 mg），加入含蛋白酶抑制剂与去修饰酶抑制剂（如 TSA、NAM）的裂解液，超声裂解后 14,000 g 离心取上清，BCA 定量。

蛋白酶解

按 1:50（w/w）加入胰蛋白酶，37 °C 酶解过夜；酶解肽段经 C18 除盐柱纯化并冻干。

抗体富集

将修饰泛抗体偶联磁珠/凝胶与肽段（建议抗体:蛋白 = 1:50–1:100，单次富集蛋白投入量 0.5–2 mg）在结合缓冲液中 4 °C 旋转孵育过夜。

洗涤与洗脱

依次用洗涤缓冲液 I、II、III 清洗 3–4 次，去除非特异性吸附；随后用洗脱缓冲液洗脱目标修饰肽段，C18 除盐后冻干备用。

质谱检测 / 验证

富集产物进入 LC-MS/MS 修饰组学检测（可交由 Mass Hub 组学服务完成）；或以印迹转移用于化学发光/荧光检测，验证整体修饰水平变化。

数据分析

质谱原始文件经数据库检索（含对应修饰变量修饰类型），完成修饰位点鉴定、定量与差异分析，交付标准修饰组学报告。

送样与产物运输

送样建议	细胞 ≥ 5×10⁶ 个/样；组织 ≥ 50 mg/样；或直接送酶解后肽段（≥ 0.5–2 mg 蛋白当量）。
富集产物形式	胶条（SDS-PAGE 浓缩胶处切下，放入 EP 管中，纯水没过胶条）、磁珠或洗脱液。
运输条件	胶条、磁珠：冰袋（4 °C）运输；洗脱液：干冰运输。避免反复冻融。

注意事项

样品处理全程需加入去修饰酶抑制剂；MARylation 样品建议加入 ADP-核糖基水解酶抑制剂（如 PDD00017273）并全程低温快速操作，避免修饰降解。
富集实验建议保持抗体与肽段投入量比例稳定；不同批次样品间保持一致以保证定量可比性。
洗脱后肽段请尽快除盐冻干，-80 °C 保存，避免反复冻融。
本试剂盒仅供科研使用（RUO），不得用于临床诊断。

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