SILAC 蛋白质组

SILAC Proteomics · 常规蛋白质组

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概述

活细胞水平的代谢标记金标准。SILAC(细胞培养稳定同位素标记)在培养体系中加入重/轻同位素氨基酸,使标记在蛋白翻译时即完成,混样发生在细胞裂解前,因此可完全消除样品制备环节的定量误差,被公认为活细胞定量蛋白质组的金标准。

技术优势

实验流程

样品制备细胞 / 组织蛋白提取与酶解Trypsin化学衍生+高效富集EnrichmentLC-MS/MS检测Orbitrap数据分析与报告修饰位点定量

具体流程将根据样品类型与项目目标定制,最终以技术方案为准。

应用方向

E3 连接酶/激酶底物筛选(配合相应富集)
药物时间进程的蛋白组动态监测
蛋白相互作用定量分析

送样建议

细胞样品≥ 5×10⁶ 个细胞/样品PBS 清洗后离心去除上清,液氮速冻,干冰运输
组织样品≥ 50 mg/样品新鲜组织液氮速冻,-80 °C 保存,干冰运输
体液样品血清/血浆 ≥ 100 µL低速离心取上清,-80 °C 保存,干冰运输
重复要求每组生物学重复 ≥ 3建议设置阴/阳性对照或内参样品

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