十年质谱沉淀 · 专注修饰组学与靶向富集材料021-20273656 · info@mass-hub.com
乙酰化泛抗体富集试剂盒
蛋白质乙酰化修饰（Acetylation）多发生在赖氨酸侧链，修饰丰度低、信号易被高丰度非修饰肽段掩盖。本试剂盒以经修饰肽段亲和纯化的高亲和力乙酰化泛抗体（anti-Kac）为核心，偶联于顺磁珠/琼脂糖凝胶，可从复杂酶解肽段中特异性捕获乙酰化修饰肽段，配合高分辨质谱即可完成全蛋白水平乙酰化修饰位点的大规模鉴定与定量；亦可用于免疫印迹、免疫沉淀验证整体乙酰化修饰水平变化。赖氨酸乙酰化是最经典、研究最广泛的酰基化修饰，由组蛋白乙酰化转移酶（HAT）催化、去乙酰化酶（HDAC）逆转，广泛参与基因转录调控、代谢酶活性调节与细胞命运决定。中心代谢通路众多酶的乙酰化状态与肿瘤、代谢性疾病及衰老进程密切相关，是修饰组学研究的第一入口。
| 组分 | 规格（10 rxn / 50 rxn） | 保存条件 |
|---|---|---|
| 修饰泛抗体偶联磁珠/琼脂糖凝胶 | 500 µL / 2.5 mL | 20% 乙醇，2–8 °C，勿冻融 |
| 结合缓冲液（5×） | 10 mL / 50 mL | 2–8 °C |
| 洗涤缓冲液 I / II / III（10×） | 各 10 mL / 各 50 mL | 2–8 °C |
| 洗脱缓冲液（0.1% TFA） | 5 mL / 25 mL | 2–8 °C |
| 产品说明书与质检报告（COA） | 1 份 | — |
| 产品名称 | 乙酰化泛抗体富集试剂盒（Kac Kit） |
|---|---|
| 货号 | MH-KAC-10 / MH-KAC-50 |
| 规格 | 10 次富集 / 50 次富集（以每次 1 mg 酶解肽段计） |
| 抗体来源 | 兔源多克隆/单克隆抗体（经修饰肽段亲和纯化） |
| 识别表位 | 乙酰化赖氨酸侧链（Kac） |
| 适用样本 | 哺乳动物细胞、组织、体液蛋白等酶解肽段 |
| 交叉反应 | 与未修饰肽段及其他常见酰基化修饰交叉反应 < 5% |
| 富集倍数 | ≥ 100×（修饰肽段/非修饰肽段比例提升） |
| 保存条件 | 抗体偶联凝胶 2–8 °C 保存；衍生化试剂 -20 °C 避光保存 |
| 产物与运输 | 富集产物形式：胶条（浓缩胶处切下，置于 EP 管中，纯水没过）/ 磁珠 / 洗脱液；胶条、磁珠冰袋运输，洗脱液干冰运输 |
收集细胞（≥ 5×10⁶ 个）或组织（≥ 50 mg），加入含蛋白酶抑制剂与去修饰酶抑制剂（如 TSA、NAM）的裂解液，超声裂解后 14,000 g 离心取上清，BCA 定量。
按 1:50（w/w）加入胰蛋白酶，37 °C 酶解过夜；酶解肽段经 C18 除盐柱纯化并冻干。
将修饰泛抗体偶联磁珠/凝胶与肽段（建议抗体:蛋白 = 1:50–1:100，单次富集蛋白投入量 0.5–2 mg）在结合缓冲液中 4 °C 旋转孵育过夜。
依次用洗涤缓冲液 I、II、III 清洗 3–4 次，去除非特异性吸附；随后用洗脱缓冲液洗脱目标修饰肽段，C18 除盐后冻干备用。
富集产物进入 LC-MS/MS 修饰组学检测（可交由 Mass Hub 组学服务完成）；或以印迹转移用于化学发光/荧光检测，验证整体修饰水平变化。
质谱原始文件经数据库检索（含对应修饰变量修饰类型），完成修饰位点鉴定、定量与差异分析，交付标准修饰组学报告。
| 送样建议 | 细胞 ≥ 5×10⁶ 个/样；组织 ≥ 50 mg/样；或直接送酶解后肽段（≥ 0.5–2 mg 蛋白当量）。 |
|---|---|
| 富集产物形式 | 胶条（SDS-PAGE 浓缩胶处切下，放入 EP 管中，纯水没过胶条）、磁珠或洗脱液。 |
| 运输条件 | 胶条、磁珠：冰袋（4 °C）运输；洗脱液：干冰运输。避免反复冻融。 |
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