概述
在亚细胞层面定位修饰信号。先通过差速离心/密度梯度将细胞分离为细胞核、细胞质、线粒体、细胞膜等组分,再对各组分蛋白分别进行修饰富集与定量,从而将修饰信号定位到特定亚细胞区室,揭示修饰事件的空间生物学意义。
技术优势
- ✓ 组分分离与修饰富集耦合,降低高丰度蛋白干扰
- ✓ 线粒体、细胞核、细胞膜等组分可自由组合
- ✓ 修饰位点 + 亚细胞定位双重注释
- ✓ 适合研究修饰酶的区室化调控与转运
实验流程
具体流程将根据样品类型与项目目标定制,最终以技术方案为准。
应用方向
线粒体代谢酶琥珀酰化/乙酰化调控研究
核质穿梭蛋白的修饰依赖性转位机制
信号通路的区室化激活研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | PBS 清洗后离心去除上清,液氮速冻,干冰运输 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 新鲜组织液氮速冻,-80 °C 保存,干冰运输 |
| 体液样品 | 血清/血浆 ≥ 100 µL | 低速离心取上清,-80 °C 保存,干冰运输 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 建议设置阴/阳性对照或内参样品 |
