IP-MS 免疫沉淀质谱

IP-MS (Immunoprecipitation Mass Spectrometry) · 常规蛋白质组

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概述

目标蛋白复合体的互作组解析。以目标蛋白特异性抗体(或标签抗体)富集内源性/过表达蛋白及其复合体,经酶解后用 LC-MS/MS 鉴定结合蛋白,系统绘制目标蛋白的相互作用网络;结合泛抗体富集还可研究目标蛋白自身的修饰状态。

技术优势

实验流程

蛋白提取细胞 / 组织抗体富集特异性 / 标签酶解和样本制备TrypsinLC-MS/MS 检测Orbitrap搜库与信息分析鉴定和定量

具体流程将根据样品类型与项目目标定制,最终以技术方案为准。

应用方向

疾病蛋白复合体互作网络构建
支架蛋白/转录因子作用机制研究
蛋白药物靶点作用谱分析

送样建议

细胞样品≥ 5×10⁶ 个细胞/样品PBS 清洗后离心去除上清,液氮速冻,干冰运输
组织样品≥ 50 mg/样品新鲜组织液氮速冻,-80 °C 保存,干冰运输
体液样品血清/血浆 ≥ 100 µL低速离心取上清,-80 °C 保存,干冰运输
重复要求每组生物学重复 ≥ 3建议设置阴/阳性对照或内参样品

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