概述
色氨酰化由色氨酸供体生成的氨基酰化修饰,与犬尿氨酸、5-羟色胺等色氨酸代谢通路交叉,为神经免疫与色氨酸代谢研究提供新型蛋白层面读出。
技术原理
色氨酰化修饰目前尚无成熟的特异性富集材料,我们采用超高深度分级蛋白质组 + 谱图直接鉴定策略:样品经高 pH 反向分级增加分离维度,配合长梯度液相与 DDA/DIA 混合采集,直接从全扫描数据中鉴定色氨酰化修饰肽段,并通过靶向 PRM 验证关键位点。
技术优势
- ✓ 无需富集,避免富集偏好性引入的偏差
- ✓ 超高深度分级覆盖低丰度修饰蛋白
- ✓ PRM 靶向验证确保位点定性可靠
- ✓ 适合尚无富集材料的前沿修饰探索
实验流程
应用方向
游离氨基酸代谢库与蛋白功能的偶联研究
支链/芳香族氨基酸代谢重塑与遗传代谢病
肠道菌群-宿主氨基酸代谢互作
肿瘤氨基酸依赖性代谢(谷氨酰胺/天冬酰胺)研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗,含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨,-80 °C 保存,干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品(富集前) | BCA 定量,避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
该修饰类型属于新近系统鉴定的新型翻译后修饰,文献仍在快速积累。我们的技术团队持续跟踪最新研究进展,欢迎联系我们获取该修饰类型的定制研究方案与文献支持。
