全蛋白修饰组学 · 氨甲酰化

Proteome-wide Carbamylation Omics

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概述

氨甲酰化是异氰酸(尿素代谢衍生)对赖氨酸N端及侧链的非酶促共价修饰,在慢性肾病尿毒症环境中显著积累,与蛋白质老化、动脉粥样硬化及免疫原性相关。

技术原理

针对氨甲酰化修饰,我们采用化学衍生 / 亲和探针标记前处理策略:利用修饰基团的特异反应将可富集/可检测的报告基团选择性地连接到氨甲酰化修饰位点,再经亲和材料捕获目标肽段,最后由高分辨 LC-MS/MS 完成位点鉴定与定量。该路线突破了修饰泛抗体可得性的限制,是新型修饰检测的通用方案。

技术优势

实验流程

样品制备细胞 / 组织蛋白提取与酶解Trypsin化学衍生+高效富集EnrichmentLC-MS/MS检测Orbitrap数据分析与报告修饰位点定量

应用方向

干细胞分化与发育的表观遗传机制
肿瘤表观遗传分型与预后研究
组蛋白甲基转移酶/去甲基化酶功能研究
代谢供体库变化的蛋白层面读出

送样建议

细胞样品≥ 5×10⁶ 个细胞/样品裂解前 PBS 清洗,含去修饰酶抑制剂裂解液处理
组织样品≥ 50 mg/样品液氮速冻研磨,-80 °C 保存,干冰运输
蛋白总量≥ 1–2 mg/样品(富集前)BCA 定量,避免高盐/去污剂残留
重复要求每组生物学重复 ≥ 3组间样品处理条件保持一致

参考文献

该修饰类型属于新近系统鉴定的新型翻译后修饰,文献仍在快速积累。我们的技术团队持续跟踪最新研究进展,欢迎联系我们获取该修饰类型的定制研究方案与文献支持。

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