概述
硫酸软骨素化(CSylation)指核心蛋白特定丝氨酸位点连接硫酸软骨素糖胺聚糖链的修饰,构成蛋白聚糖(如agrin、brevican)的功能基础,参与细胞外基质组装、神经发育与肿瘤微环境构建。
技术原理
硫酸软骨素化修饰目前尚无成熟的特异性富集材料,我们采用超高深度分级蛋白质组 + 谱图直接鉴定策略:样品经高 pH 反向分级增加分离维度,配合长梯度液相与 DDA/DIA 混合采集,直接从全扫描数据中鉴定硫酸软骨素化修饰肽段,并通过靶向 PRM 验证关键位点。
技术优势
- ✓ 无需富集,避免富集偏好性引入的偏差
- ✓ 超高深度分级覆盖低丰度修饰蛋白
- ✓ PRM 靶向验证确保位点定性可靠
- ✓ 适合尚无富集材料的前沿修饰探索
实验流程
应用方向
抗体药物糖型谱与质量控制(CMC)
蛋白折叠、稳定性与免疫原性研究
O-GlcNAc 与营养感知信号研究
细胞外基质与肿瘤微环境研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗,含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨,-80 °C 保存,干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品(富集前) | BCA 定量,避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
该修饰类型属于新近系统鉴定的新型翻译后修饰,文献仍在快速积累。我们的技术团队持续跟踪最新研究进展,欢迎联系我们获取该修饰类型的定制研究方案与文献支持。
