概述
葡糖酸基化是赖氨酸侧链与葡糖酸形成的修饰,常见于重组蛋白(如抗体药物、Fab片段)生产过程中的非预期修饰,影响蛋白电荷异质性与药代动力学,是生物药质量研究(CMC)的质控指标之一。
技术原理
针对葡糖酸基化修饰,我们采用化学衍生 / 亲和探针标记前处理策略:利用修饰基团的特异反应将可富集/可检测的报告基团选择性地连接到葡糖酸基化修饰位点,再经亲和材料捕获目标肽段,最后由高分辨 LC-MS/MS 完成位点鉴定与定量。该路线突破了修饰泛抗体可得性的限制,是新型修饰检测的通用方案。
技术优势
- ✓ 无需修饰抗体,适用新型修饰的普遍路线
- ✓ 探针/衍生条件按修饰类型专属优化
- ✓ 可与其他修饰富集串联,一次取样多修饰并行
- ✓ 从方法开发到项目交付全程技术团队支持
实验流程
应用方向
抗体药物糖型谱与质量控制(CMC)
蛋白折叠、稳定性与免疫原性研究
O-GlcNAc 与营养感知信号研究
细胞外基质与肿瘤微环境研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗,含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨,-80 °C 保存,干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品(富集前) | BCA 定量,避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
该修饰类型属于新近系统鉴定的新型翻译后修饰,文献仍在快速积累。我们的技术团队持续跟踪最新研究进展,欢迎联系我们获取该修饰类型的定制研究方案与文献支持。
