概述
谷氨酰化由谷氨酸供体生成；微管蛋白多谷氨酰化（polyglutamylation）是该修饰家族的经典体系，由 TTLL 谷氨酰化酶与 CCP 去谷氨酰化酶调控，参与纤毛/鞭毛运动与神经功能。
技术原理
谷氨酰化修饰目前尚无成熟的特异性富集材料，我们采用超高深度分级蛋白质组 + 谱图直接鉴定策略：样品经高 pH 反向分级增加分离维度，配合长梯度液相与 DDA/DIA 混合采集，直接从全扫描数据中鉴定谷氨酰化修饰肽段，并通过靶向 PRM 验证关键位点。
技术优势
- ✓ 无需富集，避免富集偏好性引入的偏差
- ✓ 超高深度分级覆盖低丰度修饰蛋白
- ✓ PRM 靶向验证确保位点定性可靠
- ✓ 适合尚无富集材料的前沿修饰探索
实验流程
应用方向
游离氨基酸代谢库与蛋白功能的偶联研究
支链/芳香族氨基酸代谢重塑与遗传代谢病
肠道菌群-宿主氨基酸代谢互作
肿瘤氨基酸依赖性代谢（谷氨酰胺/天冬酰胺）研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗，含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨，-80 °C 保存，干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品（富集前） | BCA 定量，避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
[1] Rogowski K, van Dijk J, Magiera MM, et al. A family of protein-deglutamylating enzymes associated with neurodegeneration. Cell. 2010, 143(4):564-578.