概述
亚氨基生物素化是生物素的亚氨基类似物对赖氨酸的修饰，保留胍基可逆结合特性，可用作可逆型生物素亲和富集策略，在化学蛋白质组学探针设计中作为可洗脱型报告基团。
技术原理
酶解肽段先经化学衍生反应标记修饰基团，随后与高亲和力亚氨基生物素化修饰泛抗体（anti-Iminobiotinylation）偶联的磁珠/琼脂糖凝胶在 4 °C 孵育过夜，特异性捕获携带亚氨基生物素化修饰的肽段；经充分洗涤去除非修饰背景后洗脱，修饰肽段富集倍数可达百倍以上。富集产物进入高分辨 LC-MS/MS 检测，在数据库检索中以Iminobiotinylation为可变修饰完成位点鉴定；结合 SILAC / TMT / DIA 等定量策略，即可实现全蛋白水平亚氨基生物素化修饰组的精确相对定量，进而筛选亚氨基生物素化修饰调控的关键蛋白与位点。
技术优势
- ✓ 化学衍生与抗体富集联用，兼顾灵敏度与特异性
- ✓ 衍生反应经条件优化，副反应可控
- ✓ 兼容主流定量策略与 WB/IP 验证
- ✓ 配套试剂盒与服务双通道交付
实验流程
应用方向
BioID/TurboID 邻近标记蛋白质组学
羧化酶家族功能与代谢研究
蛋白相互作用与亚细胞空间图谱
可逆亲和纯化策略开发
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗，含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨，-80 °C 保存，干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品（富集前） | BCA 定量，避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
该修饰类型属于新近系统鉴定的新型翻译后修饰，文献仍在快速积累。我们的技术团队持续跟踪最新研究进展，欢迎联系我们获取该修饰类型的定制研究方案与文献支持。
配套试剂盒
本服务所用亚氨基生物素化修饰肽段亲和富集材料同步以试剂盒形式销售，支持自建流程。