概述
ISG化由干扰素刺激基因产物ISG15共价连接到靶蛋白赖氨酸上，是抗病毒固有免疫的核心效应机制。病毒感染、IFN-α治疗及肿瘤免疫治疗应答研究中，ISG化组学可系统揭示干扰素应答蛋白图谱。
技术原理
针对ISG化修饰，我们采用化学衍生 / 亲和探针标记前处理策略：利用修饰基团的特异反应将可富集/可检测的报告基团选择性地连接到ISG化修饰位点，再经亲和材料捕获目标肽段，最后由高分辨 LC-MS/MS 完成位点鉴定与定量。该路线突破了修饰泛抗体可得性的限制，是新型修饰检测的通用方案。
技术优势
- ✓ 无需修饰抗体，适用新型修饰的普遍路线
- ✓ 探针/衍生条件按修饰类型专属优化
- ✓ 可与其他修饰富集串联，一次取样多修饰并行
- ✓ 从方法开发到项目交付全程技术团队支持
实验流程
应用方向
E3 连接酶/去泛素化酶底物筛选
PROTAC 与分子胶的降解谱评估
DNA 损伤修复与基因组稳定性研究
抗病毒固有免疫（ISG15）应答研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗，含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨，-80 °C 保存，干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品（富集前） | BCA 定量，避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
[1] Durfee LA, Lyon N, Seo K, et al. The ISG15 conjugation system broadly targets newly synthesized proteins. J Biol Chem. 2010, 285(53):41443-41449.