概述
拟泛素化（NEDD8修饰）通过活化cullin-RING泛素连接酶（CRL）家族驱动泛素化级联，是肿瘤药物靶点MLN4924（Pevonedistat）的作用机制。Neddylation组学可系统评估CRL活性状态与抗肿瘤药物响应。
技术原理
针对拟泛素化修饰，我们采用化学衍生 / 亲和探针标记前处理策略：利用修饰基团的特异反应将可富集/可检测的报告基团选择性地连接到拟泛素化修饰位点，再经亲和材料捕获目标肽段，最后由高分辨 LC-MS/MS 完成位点鉴定与定量。该路线突破了修饰泛抗体可得性的限制，是新型修饰检测的通用方案。
技术优势
- ✓ 无需修饰抗体，适用新型修饰的普遍路线
- ✓ 探针/衍生条件按修饰类型专属优化
- ✓ 可与其他修饰富集串联，一次取样多修饰并行
- ✓ 从方法开发到项目交付全程技术团队支持
实验流程
应用方向
E3 连接酶/去泛素化酶底物筛选
PROTAC 与分子胶的降解谱评估
DNA 损伤修复与基因组稳定性研究
抗病毒固有免疫（ISG15）应答研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗，含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨，-80 °C 保存，干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品（富集前） | BCA 定量，避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
[1] Soucy TA, Smith PG, Milhollen MA, et al. An inhibitor of NEDD8-activating enzyme as a new approach to treat cancer. Nature. 2009, 458(7241):732-736.