概述
SUMO化(类泛素化)将SUMO家族小蛋白连接至靶蛋白赖氨酸,参与转录调控、DNA损伤修复、核质运输与蛋白复合体组装。SUMO化在应激应答中快速、大规模重编程,与神经退行性疾病、肿瘤及罕见病机制密切相关。
技术原理
针对类泛素化修饰,我们采用化学衍生 / 亲和探针标记前处理策略:利用修饰基团的特异反应将可富集/可检测的报告基团选择性地连接到类泛素化修饰位点,再经亲和材料捕获目标肽段,最后由高分辨 LC-MS/MS 完成位点鉴定与定量。该路线突破了修饰泛抗体可得性的限制,是新型修饰检测的通用方案。
技术优势
- ✓ 无需修饰抗体,适用新型修饰的普遍路线
- ✓ 探针/衍生条件按修饰类型专属优化
- ✓ 可与其他修饰富集串联,一次取样多修饰并行
- ✓ 从方法开发到项目交付全程技术团队支持
实验流程
应用方向
E3 连接酶/去泛素化酶底物筛选
PROTAC 与分子胶的降解谱评估
DNA 损伤修复与基因组稳定性研究
抗病毒固有免疫(ISG15)应答研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗,含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨,-80 °C 保存,干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品(富集前) | BCA 定量,避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
[1] Hendriks IA, Vertegaal AC. A comprehensive compilation of SUMO proteomics. Nat Rev Mol Cell Biol. 2016, 17(9):581-595.
