概述
赖氨酸丙二酰化（Kma）由脂肪酸合成前体丙二酰CoA供体化产生，2011年系统鉴定并被证实受SIRT2调控。丙二酰化集中发生在代谢酶上，与糖酵解、脂肪酸代谢及胰岛素分泌通路密切相关。
技术原理
酶解肽段与高亲和力丙二酰化修饰泛抗体（anti-Malonylation）偶联的磁珠/琼脂糖凝胶在 4 °C 孵育过夜，特异性捕获携带丙二酰化修饰的肽段；经充分洗涤去除非修饰背景后洗脱，修饰肽段富集倍数可达百倍以上。富集产物进入高分辨 LC-MS/MS 检测，在数据库检索中以Malonylation为可变修饰完成位点鉴定；结合 SILAC / TMT / DIA 等定量策略，即可实现全蛋白水平丙二酰化修饰组的精确相对定量，进而筛选丙二酰化修饰调控的关键蛋白与位点。
技术优势
- ✓ 位点级特异性富集，丙二酰化修饰鉴定深度显著提升
- ✓ 抗体-磁珠体系操作标准化，批次重现性好
- ✓ 兼容 SILAC / TMT / DIA 全部主流定量策略
- ✓ 配套试剂盒可自行操作，亦可交由服务团队完成
实验流程
应用方向
代谢重塑与酰基CoA代谢通量研究
表观遗传与基因转录调控
肿瘤及代谢性疾病的修饰标志物发现
HDAC/SIRT 等修饰酶调节剂的药理机制研究
送样建议
| 细胞样品 | ≥ 5×10⁶ 个细胞/样品 | 裂解前 PBS 清洗，含去修饰酶抑制剂裂解液处理 |
|---|---|---|
| 组织样品 | ≥ 50 mg/样品 | 液氮速冻研磨，-80 °C 保存，干冰运输 |
| 蛋白总量 | ≥ 1–2 mg/样品（富集前） | BCA 定量，避免高盐/去污剂残留 |
| 重复要求 | 每组生物学重复 ≥ 3 | 组间样品处理条件保持一致 |
参考文献
[1] Du Y, Cai T, Li T, et al. Lysine malonylation is elevated in type 2 diabetic mouse models and enriched in metabolic associated proteins. Mol Cell Proteomics. 2015, 14(2):292-302.
[2] Yao W, Hu X, Wang X. Crossing epigenetic frontiers: the intersection of novel histone modifications and diseases. Signal Transduct Target Ther. 2024, 9. DOI: 10.1038/s41392-024-01918-w.
配套试剂盒
本服务所用丙二酰化修饰肽段亲和富集材料同步以试剂盒形式销售，支持自建流程。